Annals of West University of Timişoara, ser. Biology, vol XII, pp 9-16 ANALIZA COMPARATIVĂ A UNOR PARAMETRI DIN SEDIMENTUL URINAR LA SUBIECŢI DE SEX FEMININ ŞI MASCULIN MARIOARA NICOLETA FILIMON 1, ROXANA POPESCU 2, SMARANDA RODICA GOŢIA 3, LAURA GOŢIA 3, DOINA VERDES 2 1 West University of Timisoara, Faculty of Chemistry-Biology-Geography, Department of Biology, Pestalozzi, 16, 31, Romania 2 University of Medicine and Pharmacy Victor Babes Timisoara, Departament of Cellular and Molecular Biology, E. Murgu, 2, 341, Timisoara, Romania 3 University of Medicine and Pharmacy Victor Babes Timisoara, Departament of Phisiology, E. Murgu, 2, 341, Timisoara, Romania REZUMAT Examinarea sedimentului urinar este necesară în oferirea de informaţii despre buna funcţionare a rinichilor, a întregului organism şi în depistarea posibilelor afecţiuni renale. S-a luat în studiu un lot de 129 subiecţi de sex faminin (83) şi masculin (46), la care li s-a determinat numărul de hematii, leucocite şi celule epiteliale din sedimentul urinar. Valorile obţinute au fost prelucrate statistic cu ajutorul programului statistic Minitab pentru a putea stabili daca exista sau nu diferenţe la cele 2 lotuir de subiecţi analizaţi. Numărul de hematii şi leucocite din sedimentul urinar al subiecţilor testaţi nu prezintă diferenţe semnificative la subiecţii de sex masculin şi feminin, pe când numărul celulelor epiteliale înregistrează diferenţe foarte semnificative la cele 2 sexe cu valori mai mari în cazul subiecţilor de sex feminin. Incidenţa leucocitelor în sedimentul urinar ala subiecţilor de sex masculin este mai mare decât la cei de sex feminin, la care predomină celulele epiteliale. Valoarea crescută a numărului de leucocite şi prezenţa florei bacteriene în sedimentul urinar la subiecţii de sex feminin şi masculin testaţi indică infecţii urinare. CUVINTE CHEIE: sediment urinar, hematii, leucocite, celule epiteliale INTRODUCERE Examinarea sedimentului urinar se dovedeşte a fi necesară în oferirea de informaţii despre buna funcţionare a rinichilor şi a întregului organism. Examinarea sedimentului urinar este extrem de eficientă şi deloc costisitoare. El se bazează pe numărarea elementelor care apar la nivelul frotiurilor. Sedimentul urinar este folosit pentru a depista afecţiuni glomerulare, necroze tubulare acute şi pentru depistarea bolilor pre-renale acute suspectate clinic (Anghel şi Rusu, 27). Examenul de urină este un element esenţial în identificarea şi diferenţierea sindromului nefritic de sindromul nefrotic. Sindromul nefritic este ascociat cu afecţiunile glomerulare care permit trecerea proteinelor şi hematiilor în urină. În contrast, sindromul nefrotic se caracterizează doar prin trecerea proteinelor în urină. Principalul scop al studiului este demonstrarea importanţei aspectului sedimentului urinar în aceste două afecţiuni. S-a analizat sedimentul urinar provenit de la 4 pacienţi internaţi în Clinica de nefrologie, diagnosticaţi cu o 9
FILIMON Marioara Nicoleta şi colab.: Analiza comparativă a unor parametri din sedimentul urinar la subiecţi de sex feminine şi masculin afecţiune renală ce determină apariţia sindromului nefrotic sau nefritic. S-a utilizat paralelismul tehnicilor (microscopie în câmp luminos, contrast de fază şi lumină polarizată) precum şi colorarea preparatelor microscopice acolo unde a fost necesar utilizând coloraţiile May-Grünwald-Giemsa, Sudan III. Sedimentele nefritice au ilustrat prezenţa hematiilor dismorfice, uneori acompaniate de cilindri eritrocitari. De asemenea, au putut fi observaţi numeroşi cilindri celulari şi granuloşi. Leucocitele au fost prezente doar ocazional, dar întotdeauna numărul a fost mai mic comparativ cu cel al hematiilor. Sedimentele nefrotice evidenţiază o masă de cilindri granuloşi alături de cilindri hialini, corpi grăsoşi ovali şi cilindri grăsoşi. Câteva cristale de colesterol au fost, de asemenea, prezente. O hematurie abundentă însoţită de cilindri eritrocitari a fost identificată în 2 cazuri de sindrom nefrotic cu afectare glomerulară şi proteinurie (Gîju şi colab., 29). Lucrarea conţine date referitoare la determinarea a 3 parametrii din sedimentul urinar la subiecţi de sex feminin şi masculin care s-au prezentat la examenul clinic general acuzand simptome de boala. Parametrii luaţi în calcul au fost reprezentaţi de numărul de hematii, leucocite şi celule epiteliale. MATERIALE ŞI METODE În mod normal sedimentul urinar conţine următoarele elemente: cilindrii şi celule epiteliale de la nivelul nefronilor, bazinetului, ureterelor, vezicii urinare şi uretrei; resturi de mucus; spermatozoizi de la nivelul prostatei; câteva eritrocite şi leucocite. Se trece o cantitate de urină ( ml) într-o eprubetă de centrifugă; se centrifughează minute la 2 rpm; se decantează supernatantul; sedimentul obţinut prin centrifugare: se recoltează cu o pipetă Pasteur; se picură pe o lamă curată; se acoperă cu o lamelă şi se examinează la microscop (Păunescu şi Dumitraşcu, 1999; Dumitraşcu, 22). Parametrii din sedimentul urinar au fost determinaţi la un număr de 129 subiecţii care au fost împărţiţi în două grupe: A. bărbaţi - 46 şi B. femei - 83. Parametrii din sedimentul urinar testaţi sunt reprezentaţi prin: numărul de hematii, leucocite, celule epiteliale. Datele de interes referitoare la parametrii clinici au fost selecţionate şi introduse în calculator în tabele de baze de date din modulul Microsoft Excel din pachetul de programe Microsoft Office 27 si in foaia de calcul al programului statistic Minitab. REZULTATE ŞI DISCUŢII Analizând numărul de hematii, leucocite şi celule epiteliale prezente în sedimentul urinar la subiecţii de sex masculin constatăm ca hematiile sunt crescute în 4,34% din cazuri, ceea ce indică prezenţa hematuriei, leucocitele sunt crescute în 32,6% din cazuri, ceea ce indică infecţie urinară, celulele epiteliale crescute în 26,8% din cazuri, ceea ce indică o descuamare la nivelul căilor urinare. Valorile obtinute de noi au fost exprimate ca valoare medie ± deviatia standard. Valorile medii ale numărului de hematii la subiecţii de sex masculin testaţi sunt 2,43 ± 3,22. Valorile medii ale numărului de leucocite la subiecţii de
Annals of West University of Timişoara, ser. Biology, vol XII, pp 9-16 sex masculin testaţi sunt 9,87 ± 7,44, iar valorile medii ale numărului de celule epiteliale la subiecţii de sex masculin testaţi sunt,283 ± 2,949. Analizând numărul de hematii, leucocite şi celule epiteliale prezente în sedimentul urinar la subiecţii de sex feminin constatăm ca hematiile sunt crescute în 7,31% dintre cazuri ceea ce indică prezenţa hematuriei microscopice, leucocitele sunt crescute în 2,73% dintre cazuri, ceea ce indică o infecţie urinară, epiteliile sunt crescute în 28,4% dintre cazuri, ceea ce indică o descuamare la nivelul căilor urinare. Valorile medii ale numărului de hematii la subiecţii de sex feminine testaţi sunt 2,89 ± 3,381. Valorile medii ale numărului de leucocite la subiecţii de sex feminine testaţi sunt,9 ±,76. Valorile medii ale numărului de cellule epiteliale la subiecţii de sex feminine testaţi sunt 6,9 ± 3,349. 7.% 63.4% 6.% Incidenta.% 4.% 3.% 2.% 21.73% 13.4% 19.6% 4.6% 39.13% 32.6% 26.8% 13.4%.% 4.34% 4.34%.% normal usor crescut crescut absent Parametrii analizati Hematii Leucocite Epitelii FIG. 1. Parametrii din sedimentul urinar la subiecţii de sex masculin 3 2 Hematii Mean 2.43 StDev 3.22 N 46 2-4 4 8 12 16 FIG. 2. Histograma Valorile hematiilor 11
FILIMON Marioara Nicoleta şi colab.: Analiza comparativă a unor parametri din sedimentul urinar la subiecţi de sex feminine şi masculin 2 Leucocite Mean 9.87 StDev 7.44 N 46-8 8 16 24 32 FIG. 3. Histograma Valorile leucocitelor 2 Epitelii Mean.283 StDev 2.949 N 46 3 6 9 12 FIG. 4. Histograma Valorile celulelor epiteliale Incidenta 7.% 6.%.% 4.% 3.% 2.%.%.% 6.8% 21.9% 23.17% 21.9% 7.31% 48.78% 7.31% 2.73% 28.4% 4.87% normal usor crescut crescut absent Rezultatele analizelor Hematii Leucocite Epitelii FIG.. Parametrii din sedimentul urinar la subiecţii de sex feminin Am încercat de asemenea să vedem dacă există sau nu diferenţe semnificative statistic între valorile obţinute la cele 2 grupuri: A (femei) şi B (barbati) pentru acelaşi parametru. S-a aplicat testul t (TTEST two tailed 12
Annals of West University of Timişoara, ser. Biology, vol XII, pp 9-16 distribution, non equal variance). Interpretarea s-a făcut analizând valoarea obţinută a lui p comparativ cu pragul de semnificaţie ales p =,. De asemenea, am reprezentat grafic intervalul de încredere al mediei celor două eşantioane (A şi B) pentru nivelul de încredere de, (din programului statistic Minitab). Dacă intervalele de încredere se suprapun putem concluziona că între cele două eşantioane nu există diferenţe semnificative, dacă nu se suprapun vorbim de diferenţe semnificative între cele două grupuri: A şi B, respectiv femei şi bărbaţi. Interpretarea s-a facut analizând valoarea obtinută a lui p la un prag de semnificatie,: >. nesemnificativ,,1-, semnificativ,.1-.1 foarte semnificativ, <.1 extrem de semnificativ (Marusteri, 2). Calculând valoarea lui p cu ajutorul programului de calcul statistic constatăm că la subiecţii de sex masculine şi feminin pentru numărul de hematii p =.66. Deoarece p calculat este mai mare decât valoarea lui p luată în calcul de noi putem concluziona că nu există diferenţe semnificative între cele 2 loturi în ceea ce priveşte numărul de hematii din sedimentul urinar la subiecţii testaţi. Ttest (p) între A şi B (femei bărbaţi) şi intervale de incredere MINITAB. Calculând valoarea lui p cu ajutorul programului de calcul statistic constatăm că la subiecţii de sex masculine şi feminin pentru numărul de leucocite p =.866. Pe baza valorii lui p putem concluziona că nu există diferenţe semnificative între cele 2 loturi în ceea ce priveşte numărul de leucocite din sedimentul urinar, doar valori uşor crescute la subiecţii de sex feminin. Calculând valoarea lui p cu ajutorul programului de calcul statistic constatăm că la subiecţii de sex masculin şi feminin pentru numărul de leucocite p =.. Pe baza valorii lui p putem concluziona că există diferenţe foarte semnificative între cele 2 loturi în ceea ce priveşte numărul de celule epiteliale din sedimentul urinar, înregistrându-se valori mai mari la subiecţii de sex feminin. 6 Hematii Mean 2.89 StDev 3.381 N 82 4 3 2-4 4 8 12 16 2 FIG. 6. Histograma Valorile hematiilor 13
FILIMON Marioara Nicoleta şi colab.: Analiza comparativă a unor parametri din sedimentul urinar la subiecţi de sex feminine şi masculin Leucocite 2 Mean.9 StDev.76 N 82 2 FIG. 7. Histograma Valorile leucocitelor Epitelii 2 2 Mean 6.9 StDev 3.349 N 82 4 8 12 16 FIG. 8. Histograma Valorile celulelor epiteliale 2 Hematii Data A B FIG. 9. Hematii: reprezentarea grafică a intervalelor de încredere 14
Annals of West University of Timişoara, ser. Biology, vol XII, pp 9-16 3 Leucocite Data 3 2 2 A B FIG.. Leucocitele: reprezentarea grafică a intervalelor de încredere 2 Epitelii Data A B FIG. 11. Celulele epiteliale: reprezentarea grafică a intervalelor de încredere CONCLUZII Incidenţa leucocitelor în sedimentul urinar ala subiecţilor de sex masculin este mai mare decât la cei de sex feminin, la care predomină celulele epiteliale. Numărul de hematii şi leucocite din sedimentul urinar al subiecţilor testaţi nu prezintă diferenţe semnificative la subiecţii de sex masculin şi feminin, pe când numărul celulelor epiteliale înregistrează diferenţe foarte semnificative la cele 2 sexe cu valori mai mari în cazul subiecţilor de sex feminin. Valoarea crescută a numărului de leucocite şi prezenţa florei bacteriene în sedimentul urinar la subiecţii de sex feminin şi masculin testaţi indică infecţii urinare. BIBLIOGRAFIE Anghel, A., Rusu V., Experimente de Chimie şi Biochimie Medicală, Editura Eurostampa, 27. Dumitraşcu, V., Medicină de laborator. Biochimia urinii, Editura Orizonturi Universitare, Timişoara, 22.
FILIMON Marioara Nicoleta şi colab.: Analiza comparativă a unor parametri din sedimentul urinar la subiecţi de sex feminine şi masculin Gîju, S., Flangea C., Dumitraşcu, V., Daliborca, V., Petrică L., Sindroamele nefrologice-sedimente nefritice şi nefrotice, Revista Română de Medicină de Laborator, (2), p.138, 29. Măruşteri, M., Biostatistică - aplicaţii practice şi exerciţii recapitulative pentru studenţii Şcolii Doctorale, Universitatea de Medicină şi Farmacie Tîrgu Mureş, 2 Păunescu V., Dumitraşcu, V., Medicină de laborator. Biochimie clinică, Editura Orizonturi Universitare, Timişoara, 1999. 16